Для определения интермедина в качестве подопытных животных применяются рыбы вида Fundulus heteroclitus. Распространение интермедина изучается на денервированной хвостовой части рыб. За единицу действия принимается количество гормона, вызывающее через 30 минут после внутрибрюшинного введения потемнение в этой части тела у четверти рыб.