α- и β-фракции нейтральных 17-кетостероидов в моче (определение по О. В. Уваровской). Из эфирного экстракта, полученного при определении нейтральных 17-кетостероидов, берут 2 мл в центрифужную пробирку и выпаривают досуха в водяной бане при температуре 40—50°. Затем пробу выдерживают в эксикаторе над хлористым кальцием 1—2 часа и прибавляют 0,5 мг 1%-ного спиртового раствора дигитонина (спирт должен быть абсолютным!).
Смесь подогревают в водяной бане 3 минуты при температуре 60°, затем охлаждают и помещают в холодильник на 12 часов. К 1%-ному спиртовому раствору дигитонина через 12 часов прибавляют 3 мл эфира, перемешивают стеклянной палочкой, центрифугируют 10—12 минут, центрифугат сливают. Эту процедуру проделывают 4 раза. Содержащие а-фракцию эфирные экстракты сливают вместе, измеряют их количество, берут 4 мл, выпаривают их при температуре 40—50° в водяной бане, подсушивают и проводят циммермановскую реакцию. Расчет производят по формуле
где х — искомая величина — количество α-фракции в миллиграммах за сутки; А — общее количество эфирного экстракта, мл; B1 — количество гамм, найденное по калибрационной кривой или таблице (той же самой, что и для 17-кетостероидов); С — общее количество эфирного экстракта после экстрагирования а-фракции; D — количество мочи, выделенной за сутки, мл; К — количество общего эфирного экстракта, взятого из экстракта на определение 17-кетостероидов для осаждения α- или β-фракции; М — количество мочи, взятой для анализа, мл; В2 — количество эфирного экстракта, взятого для колориметрирования.
β-Фракцию определяют, прибавляя к плотному остатку от α-фракции 1 мл эфира, выпаривая в водяной бане, высушивая и проводя циммермановскую реакцию, высчитывают по формуле
(обозначения те же).
После расчета α- и β-фракций 17-кетостероидов в миллиграммах в сутки находят их соотношение, а затем рассчитывают относительный процент каждой фракции. Сумму α- и β-фракций в миллиграммах в сутки принимают за 100%, а количество миллиграммов в сутки каждой фракции за х%.
В норме α : β = 7 : 1—9 : 1; а-фракция 85—95%; β-фракция 5—15%.