Для определения функционального состояния эндокринных желез в период климакса и менопаузы большое значение имеет определение экскретируемых ими гормонов: а) половых, б) коры надпочечника и в) гипофиза (гонадотропинов). В последние годы для определения гормонов пользуются главным образом спектрофотометрией и калориметрией.
а) Половые гормоны. 1. Эстрогенные гормоны. Определяются в моче. Определение их в крови из-за технических трудностей почти не производится. Наибольшее распространение получил метод фракционного определения эстрогенов в моче [И. Б. Браун, Б. Ф. Штиммел (I. В. Brown, В. F. Stimmel)].
Подробное описание этого метода см. в работе О. Н. Савченко и Г. С. Степанова.
Результаты фракционного определения эстрогенов методом Брауна у женщин при различных функциональных состояниях, подтвержденные многочисленными исследованиями зарубежных авторов [Мак Брайд, Гринвуд (Мс. Bride, Greenword) и др.] представлены в таблице 12.
| Число обследованных | Эстрогены в мг за 24 часа | ||||
| эстрон | эстрадиол | эстриол | сумма | ||
| Сохраненный менструальный цикл После кастрации Период менопаузы |
4 2 12 |
0,0—16,3 1,0—2,7 0,0—5,0 |
0,0—8,5 0,0—1,9 0,8—2,6 |
1,3—46,4 0,7—2,6 0,0—44,1 |
5,0—60,0 4,7—5,1 4,0—46,4 |
Модифицируя метод Штиммеля, Е. А. Какушкина и В. Г. Орлова разработали методику хроматографической адсорбции для разделения и количественного определения эстрона, эстрадиола и эстриола в моче небеременных женщин, однако последняя в настоящее время подверглась критике (О. Н. Савченко и Г. С. Степанов).
При определении выделения эстрогенных гормонов с мочой при помощи хроматографического метода (в модификации Какушкиной — Орловой) Е. М. Вихляева установила, что в течение первых двух лет после прекращения менструаций у большинства обследованных ею женщин выделяется от 123 до 273 у эстрогенных гормонов за 24 часа, а по данным О. Н. Савченко (метод Жайль и Крепи в модификации Лейбсона), у большинства женщин в течение первых двух лет после прекращения менструаций в сутки экскретируется от 42 до 14 мг, а при более длительном отсутствии менструаций — от 22 до 6,5 мг. По данным Пинкуса, изучавшего изменение стероидов в моче биологическим методом, общее количество эстрогенов в период менопаузы снижается с 25 единиц в 40 лет до 10 единиц в 60 лет. Особенно уменьшается количество эстрона — с 13 единиц в 40 лет до 4—5 единиц в 60 лет и эстрадиола, который снижается с 7,5 до 3 единиц; эстриол падает менее резко. По данным Мак Брайда, количество эстрогенов у женщины в период менопаузы можно сравнить с количеством эстрогенов, экскретируемых молодой женщиной в той фазе цикла, когда содержание эстрогенов наиболее мало.
В связи с тем что авторы пользовались различными методиками, результаты определения количества экскретируемых эстрогенов оказались различными. Однако общая закономерность снижения экскреции эстрогенов в период менопаузы довольно четко выступает во всех приведенных работах.
Гормон желтого тела (прогрестерон). Гормон желтого тела выделяется в моче в виде метаболита прегнандиола. О наличии в организме желтого тела судят по количеству прегнандиола. Существуют качественные и количественные методы определения содержания прегнандиола в моче. Наиболее распространенным методом является определение его путем цветной реакции, — метод Гуттермана, модифицированный Г. В. Ордынец. Сущность метода заключается в гидролизе комплексного соединения прегнандиола с серной кислотой и в экстрагировании свободного прегнандиола толуолом. О наличии прегнандиола судят по цветной реакции осадка с концентрированной серной кислотой.
У здоровых менструирующих женщин количество прегнандиола в моче меняется в зависимости от фаз менструального цикла: в фолликулярную фазу в сутки выделяется от 0,1 до 0,7 мг, в лютеиновую фазу— 12—15 мг. За 1—2 суток до начала менструаций количество прегнандиола снижается до 0,3—2 мг. Систематическое определение содержания лютеогормона имеет большое значение при различных нарушениях менструального цикла, особенно при аменореях неясного происхождения. В период менопаузы, поданным Пинкуса, ежедневно экскретируется от 0,28 до 0,86 мг прегнандиола в сутки.
б) Гормоны коры надпочечника. Определение этих гормонов, в частности 17-кетостероидов, приобрело в последние годы особое значение, так как позволяет судить о функциональном состоянии коры надпочечника. Применение разработанного Е. А. Какущкиной и В. Г. Орловой метода хроматографической адсорбции для определения нейтральных 17-кетостероидов в моче по фракциям позволило авторам выявить шесть фракций 17-кетостероидов. При обследовании мочи 200 человек получены хроматограммы для различных физиологических и патологических состояний женского организма. Женщины выделяли с мочой за сутки от 4 до 12 мг различных фракций 17-кетостероидов, мужчины—от 7 до 21 мг. По данным Гамбургера (Hamburger) и Неттера общее количество выделяемых 17-кетостероидов мало изменяется от 20 лет и до глубокой старости, распределение же отдельных фракций 17-кетостероидов меняется значительно. Особенно это касается α-17-кетостероидов, экскреция которых снижается с 8 (в 40 лет) до 5,5 мг (в 60 лет), андростерона и этиохоланалона, снижающихся с 5,3 до 3 мг.
в) Гонадотропные гормоны (гипофизарные гонадотропины). По методу Цондека определение гонадотропинов в моче производится путем спиртового осаждения и растворения полученного осадка в дистиллированной воде. Определение активности проводится на инфантильных мышах, которым вводят гонадотропные гормоны (инъекции делаются через 5—6 часов, всего 6 инъекций). Реакцию учитывают через 96—100 часов по следующим показателям: 1) увеличение веса яичников (пропорционально введенной дозе); 2) рост фолликулов; 3) кровоизлияние в фолликул (геморрагический фолликул); 4) образование желтых тел.
Вне беременности у женщин с мочой выделяется небольшое количество гонадотропных гормонов, меньше 50 мышиных единиц (м. е.), образующихся передней долей гипофиза. В период климакса и менопаузы выделение гонадотропных гормонов значительно повышается (до 200 м. е.). Передняя доля гипофиза в повышенном количестве продуцирует фолликулостимулирующий гормон в III стадии климакса, т. е. когда яичник прекращает свою функцию. Выделение этого гормона с мочой (до 111 м. е. в 1 л мочи) держится до глубокой старости. Через 10 дней после хирургической кастрации в 86,6% случаев в моче появляется фолликулостимулирующий гормон (А. Э. Мандельштам), который обнаруживается в моче и через много лет после удаления яичников. Значительно повышается выделение фолликулостимулирующего гормона (свыше 400 м. е. в 1 л) и после рентгенокастрации.
Применяющиеся в настоящее время методы определения гонадотропинов в моче (осаждение таниновой кислотой, экстракция из мочи комбинированным использованием бензойной и вольфрамовой кислот, адсорбционные методы выделения и др.) так же, как и спиртоосадительный метод Цондека, являются сложными и недостаточно точными. Критически оценивая указанные методы определения гонадотропинов, О. Н. Савченко и Г. С. Степанов разработали метод определения гонадотропинов, основанный на адсорбции гонадотропинов на молекулярном адсорбенте *.
Суточная экскреция гипофизарных гонадотропинов у обследованных ими женщин, выраженная в мышино-маточных единицах, представлена в таблице 13.
| Число обследованных | Возраст в годах | Количество определений | Суточная экскреция гонадотропинов (в мышиных единицах) | |||
| минимум | максимум | средние | ||||
| Нормальный менструальный цикл Менопауза |
7 35 |
28—45 40—63 |
92 50 |
7 11 |
174 934 |
— 274 ± 115 |
* О. Н. Савченко и Г. С. Степанов. Фракционное определение эстрогенов в моче небеременных женщин. Проблема эндокринологии и гормонотерапии, 1961, т. VII, № 3, стр. 42—48.