Микроскопическое исследование мокроты включает изучение нативных (естественных, необработанных) и окрашенных препаратов. Для первых отбирают гнойные, кровянистые, крошковатые комочки, переносят их на предметное стекло в таком количестве, чтобы при накрывании покровным стеклом образовался тонкий полупрозрачный препарат. При малом увеличении микроскопа могут быть обнаружены спирали Куршманна в виде плотных тяжей слизи различной величины. Они состоят из центральной плотной блестящей извитой осевой нити и спиралеобразно окутывающей ее мантии (рис. 9), в которую бывают вкраплены лейкоциты. Спирали Куршманна появляются в мокроте при спазме бронхов. При большом увеличении в нативном препарате (рис. 11) можно обнаружить лейкоциты, эритроциты, альвеолярные макрофаги, клетки сердечных пороков, цилиндрический и плоский эпителий, клетки злокачественных опухолей, друзы актиномицетов, грибки, кристаллы Шарко—Лейдена, эозинофилы. Лейкоциты — серые зернистые круглые клетки. Большое количество лейкоцитов можно обнаружить при воспалительном процессе в органах дыхания. Эритроциты — небольшие гомогенные желтоватые диски, появляющиеся в мокроте при пневмонии, застое в малом круге кровообращения, инфаркте легкого и разрушении ткани. Альвеолярные макрофаги — клетки размером в 2—3 раза больше лейкоцитов с обильной крупной зернистостью в цитоплазме. Путем фагоцитоза они очищают легкие от попадающих в них частиц (пыли, распада клеток). Захватывая эритроциты, альвеолярные макрофаги превращаются в клетки сердечных пороков (рис. 12 и 13) с желто-бурыми зернами гемосидерина, дающими реакцию на берлинскую лазурь. Для этого к комочку мокроты на предметном стекле прибавляют 1—2 капли 5% раствора желтой кровяной соли и столько же 2% раствора соляной кислоты, смешивают, накрывают покровным стеклом. Через несколько минут микроскопируют. Зерна гемосидерина окрашиваются в синий цвет.
Цилиндрический эпителий дыхательных путей распознается по клиновидной или бокаловидной форме клеток, на тупом конце которых в свежей мокроте видны реснички; его много при остром бронхите и остром катаре верхних дыхательных путей. Плоский эпителий — большие многоугольные клетки из полости рта, диагностического значения не имеют. Клетки злокачественных опухолей — большие, различной неправильной формы с крупными ядрами (для распознавания их требуется очень большой опыт исследующего). Эластические волокна — тонкие, извитые, двухконтурные бесцветные волоконца одинаковой толщины на всем протяжении, разветвляющиеся надвое на концах. Они часто складываются кольцевидными пучками. Встречаются при распаде легочной ткани. Для более надежного их обнаружения несколько миллилитров мокроты кипятят с равным количеством 10% едкой щелочи до растворения слизи. После остывания жидкость центрифугируют, прибавив к ней 3—5 капель 1% спиртового раствора эозина. Осадок микроскопируют. Эластические волокна выглядят, как описано выше, но ярко-розового цвета (рис. 15). Друзы актиномицетов для микроскопирования раздавливают в капле глицерина или щелочи. Центральная часть друзы состоит из сплетения тонких нитей мицелия, его окружают лучисто расположенные колбовидные образования (рис. 14). При окраске раздавленной друзы по Граму мицелий окрашивается в фиолетовый, колбочки в розовый цвет. Грибок кандида альбиканс имеет характер почкующихся дрожжевых клеток или короткого ветвистого мицелия с небольшим числом спор (рис. 10). Кристаллы Шарко — Лейдена — бесцветные ромбические кристаллы разной величины (рис. 9), образующиеся из продуктов распада эозинофилов, встречаются в мокроте наряду с большим количеством эозинофилов при бронхиальной астме, эозинофильных инфильтратах и глистных инвазиях легкого. Эозинофилы в нативном препарате отличаются от других лейкоцитов крупной блестящей зернистостью, они лучше различимы в мазке, окрашенном последовательно 1% раствором эозина (2—3 мин.) и 0,2% раствором метиленового синего (0,5 мин.) или по Романовскому — Гимзе (рис. 16). При последней окраске, а также при окраске по Маю — Грюнвальду распознают опухолевые клетки (рис. 21).
Рис. 9. Спираль Куршмана (вверху) и кристаллы Шарко—Лейдена в мокроте (нативный препарат). Рис. 10. Candida albicans (в центре) — почкующиеся дрожжеподобные клетки и мицелий со спорами в мокроте (нативный препарат). Рис. 11. Клетки мокроты (нативный препарат): 1 — лейкоциты; 2 — эритроциты; 3 — альвеолярные макрофаги; 4 — клетки цилиндрического эпителия. Рис. 12. Клетки сердечных пороков в мокроте (реакция на берлинскую лазурь). Рис. 13. Клетки сердечных пороков в мокроте (нативный препарат). Рис. 14. Друза актиномицетов в мокроте (нативный препарат). Рис. 15. Эластические волокна в мокроте (окраска эозином). Рис. 16. Эозинофилы в мокроте (окраска по Романовскому — Гимзе): 1 — эозинофилы; 2 — нейтрофилы. Рис. 17. Пневмококки и в мокроте (окраска по Граму). Рис. 18. Диплобациллы Фридлендера в мокроте (окраска по Граму). Рис. 19. Палочка Пфейффера в мокроте (окраска фуксином). Рис. 20. Микобактерии туберкулеза (окраска по Цилю— Нельсену). Рис. 21. Конгломерат раковых клеток в мокроте (окраска по Маю — Грюнвальду).
Микроскопическое исследование включает изучение нативных и окрашенных препаратов. Для приготовления нативного препарата мокроту наливают тонким слоем в чашки Петри и на темном фоне отбирают гнойные, кровянистые, крошковатые комочки извитые белые нити, переносят их на предметное стекло и накрывают покровным. При исследовании нативного препарата можно обнаружить клеточные элементы, эластические волокна, спирали Куршмана, кристаллические образования, животных и растительных паразитов.
При малом увеличении обнаруживают спирали Куршмана в виде тяжей слизи различной величины, состоящих из центральной осевой нити и спиралеобразно окутывающей ее мантии (цветн. рис. 9). В последнюю нередко вкраплены лейкоциты, клетки цилиндрического эпителия, кристаллы Шарко—Лейдена. Осевая нить при поворотах микровинта то ярко блестит, то становится темной, может быть незаметна, а часто видна только она одна. Спирали Куршмана появляются при спазме бронхов, чаще всего при бронхиальной астме, реже при пневмониях, раке.
При большом увеличении обнаруживают следующее. Лейкоциты присутствуют всегда в мокроте, их много при воспалительных и нагноительных процессах; среди них встречаются эозинофилы (при бронхиальной астме, астмоидном бронхите, глистных инвазиях легких), отличающиеся крупной блестящей зернистостью (цветн. рис. 7). Эритроциты единичные могут быть в любой мокроте, их может быть много при разрушении ткани легкого, при пневмонии и застое крови в малом круге кровообращения. Эпителий плоский — крупные полигональные клетки с малым ядром, попадающие в мокроту из глотки и полости рта, диагностического значения не имеют. Эпителий цилиндрический мерцательный появляется в мокроте в значительном количестве при поражениях дыхательных путей. Единичные клетки могут быть в любой мокроте, они удлиненной формы, один конец заострен, другой — тупой, несет реснички, обнаруживаемые только в свежей мокроте; при бронхиальной астме встречаются округлые группы этих клеток, окруженные подвижными ресничками, придающими им сходство с реснитчатыми инфузориями.
Альвеолярные макрофаги — округлые клетки в 2—4 раза больше лейкоцита с 1—2 ядрами, часто прикрытыми обильными цитоплазматическими включениями, которые могут быть бесцветными, черными от частиц угля (пылевые клетки), желто-коричневыми от гемосидерина («клетки сердечных пороков», сидерофаги). Клетки злокачественных опухолей могут быть определены в нативном препарате при резко выраженной их атипии (большие клетки уродливой формы с крупным ядром, иногда 2—3 ядрами разной величины и формы); более убедительны для диагностики рака легкого комплексы полиморфных клеток либо описанного выше характера, либо мелких, с четко очерченными ядрами и иным, чем у других клеток мокроты, коэффициентом преломления света. Еще достовернее определение клеток злокачественных опухолей в окрашенных препаратах. Эластические волокна появляются в мокроте при распаде легочной ткани. Это тонкие двуконтурные волоконца, изогнутые, дихотомически ветвящиеся, располагающиеся пучками, нередко кольцевидными. В нативном препарате встречаются редко, для обнаружения их концентрируют: к нескольким миллилитрам мокроты прибавляют равное количество 10% раствора едкой щелочи, нагревают до растворения слизи, остужают и наливают в центрифужную пробирку, в которую налито 5—7 капель 1% спиртового раствора эозина, центрифугируют. Осадок микроскопируют. Эластические волокна выделяются яркой красной окраской (цветн. рис. 11). Гельминты в мокроте обнаруживаются редко, несколько чаще встречаются их яйца, а при прорыве эхинококкового пузыря — сколексы, крючья, обрывки оболочки; иногда с мокротой выделяются мигрирующие личинки аскарид. Из простейших изредка встречаются амебы (Entamoeba gingivalis), трихомонады и токсоплазмы. Из растительных паразитов наибольшее значение имеют лучистые, дрожжевые и плесневые грибки. Для обнаружения лучистого грибка (актиномицета) в мокроте отыскивают мелкие желтоватые плотные крупинки (друзы), переносят их на предметное стекло в каплю глицерина или щелочи и раздавливают под покровным стеклом. Характерным для друзы является состоящая из сплетения мицелия центральная часть, окруженная зоной лучисто расположенных колбовидных образований (цветн. рис. 12). При окрашивании раздавленной друзы по Граму мицелий приобретает фиолетовый, колбочки — розовый цвет. Из дрожжевых грибков наибольшее значение имеет Candida albicans. В нативных препаратах обнаруживают почкующиеся клетки и короткий ветвистый мицелий, на котором споры расположены мутовками (цветн. рис. 10). Плесневые грибки (искать в свежей мокроте) имеют широкие нити мицелия и круглые зеленоватые споры. На среде Сабуро дают характерный рост. Кристаллы Шарко — Лейдена — бесцветные октаэдры разной величины, образуются при распаде эозинофилов; кристаллы гематоидина буро-красные, ромбические или игольчатые появляются после легочных кровоизлияний; кристаллы холестерина, жирных кислот и мыл (см. рис. к ст. «Кал») — при длительном застое гнойной или гнилостной мокроты.
Цитологическое исследование. Изучают нативные и окрашенные препараты. Для исследования клеток комочки мокроты осторожно растягивают на предметном стекле при помощи лучинок. При поисках опухолевых клеток материал отбирают в нативном препарате. Высохший мазок фиксируют метанолом и окрашивают по Романовскому — Гимзе (или по Папаниколау). Раковые клетки характеризуются гомогенной, иногда вакуолизированной цитоплазмой от серо-голубого до синего цвета, большим рыхлым, а нередко гиперхромным, фиолетовым ядром с ядрышками. Ядер может быть 2—3 и более, порой они неправильной формы; характерен полиморфизм ядер в одной клетке.
Наиболее убедительны комплексы полиморфных клеток описанного характера (цветн. рис. 13 и 14). Эозинофилы окрашивают либо по Романовскому — Гимзе, либо последовательно 1% раствором эозина (2 мин.) и 0,2% раствором метиленового синего (0,5—1 мин.).