17-гидрооксикортикостероиды

17-гидрооксикортикостероиды (определение в крови но методу Редди, Дженкинса и Торна в модификации Ю. Н. Гурского и Г. В. Ордынца). В пробирку с притертой пробкой объемом 25 мл помещают 10 мл мочи, которую подкисляют 25%-ной серной кислотой до рН 2,5. Прибавляют к моче 2 г сернокислого натрия и 10 мл нормального бутилового спирта. Пробирку закрывают притертой пробкой, мочу перемешивают на аппарате для встряхивания в течение 10 минут. После десятиминутного встряхивания пробирку центрифугируют и слой бутанола тщательно отсасывают пипеткой с резиновой грушей в чистую пробирку с притертой пробкой. К бутаноловому экстракту добавляют 0,5 г прокаленного углекислого натрия, пробирку встряхивают 2 минуты и затем центрифугируют.

В две пробирки, приспособленные для выпаривания из них растворителя под вакуумом, отбирают по 2 мл бутанолового экстракта. Бутиловый спирт удаляется выпариванием при 60 + 2° под уменьшенным давлением. К сухому остатку, полученному после удаления бутилового спирта, прибавляют в каждую пробирку по 1 мл этанола. В первую пробирку, которая служит контролем (А), прибавляют 3 мл 56%-ной серной кислоты, во вторую —3 мл раствора (65 мг солянокислого фенилгидразина в 100 мл 56%-ной серной кислоты) (Б). Обе пробирки помещают для развития цвета в водяную баню при 60° на 40 минут. Абсорбция измеряется на спектрофотометре СФ-4 при 410 миллимикронах и затем из показателей опыта Б (вторая пробирка) вычитаются показатели контроля А (первая пробирка). Калибрациониая кривая строится по свободному кортизону.

Расчет 17-гидрооксикортикостероидов, выделенных с мочой за 24 часа, производится по формуле:
= микрограммов за 24 часа,
где Ах—абсорбция цвета, измеренная при 410 миллимикронах для данного образца мочи; А — суточное количество мочи, мл; 10 — количество бутанола, употребляемое для экстракции 17-гидрооксикортикостероидов, мл; 0,0125 — абсорбция микрограмма кортизона при 410 миллимикронах; 10—моча, взятая из суточного количества мочи на анализ, мл; 2 — количество бутанолового экстракта кортикостероидов, взятого для выпаривания растворителя и проведения цветной реакции, мл.

Поскольку 10; 0,0125; 10 и 2 являются постоянными величинами, формула может быть написана следующим образом:
Ах Х А Х 40 = микрограммов за 24 часа,
или
Ах X А Х 0,04=микрограммов за 24 часа.