Дополнением к этим данным служат наблюдения Авакяна [1]. 27 больным давали внутрь по 80 мг химотрипсина в капсулах, растворяющихся в кишечнике. Спустя 2, 4 и 6 ч определяли протеолитическую активность сыворотки крови. Через 4 ч после приема фермента активность достигала максимума, а затем быстро падала.
Отсутствие ясно выраженных биохимических изменений или иных реакций в организме после введения протеолитических ферментов породило некоторый скепсис в отношении этой формы терапии, который продолжал существовать несмотря на хорошие клинические результаты. Фармакологическими основаниями для парэнте-рального, перорального и ректального применения про-теаз служат деполимеризация белков, а также их комплексов с другими биохимическими компонентами тканей и постепенное восстановление нормальных физиологических условий проницаемости [34—36].
Вообще говоря, ферменты могут оказывать свое действие либо прямым, либо непрямым путем. Иннерфилд и сотр. [54] впервые показали, что после введения per os некоторых форм протеаз возрастает антитромбиновая активность плазмы крови. Эта реакция зависит от дозы фермента: малые дозы повышают, а очень большие — понижают антитромбиновую активность.
Смит [50] подробно описывает биохимические изменения после перорального введения бромелина. У кроликов, получивших 5 мг/кг фермента, спустя 30 мин отмечалось увеличение протромбинового времени до 250% по отношению к норме; повышался также уровень плазмина в сыворотке:
Доза бромелина, мг | Концентрация плазмина в сыворотке крови кролика (Е/мл) через различные промежутки времени после дачи бромелина per os (Е/мл) | ||||
0 мин | 30 мин | 60 мин | 150 мин | 270 мин | |
100 | 4,0 | 8,0 | 10,4 | 17,7 | 10,6 |
25 | 5,6 | 10,7 | 15,5 | 16,8 | 10,0 |
15 | 4,4 | 7,6 | 9,2 | 6,4 | 5,6 |
Повышение уровня плазмина ускоряет лизис фибрина. Как показало количественное исследование, 1 мг бромелина активировал столько плазминогена, сколько его активируют 4000 Е стрептокиназы.
Помимо экзогенных протеаз вроде бромелина или трипсина в последние годы стал известен ряд протеаз самого организма, например кинины, которые активируются экзогенными ферментами. Брадикинин участвует в общей воспалительной реакции; Иннерфилд изучал влияние на него протеаз (папаина, стрептокиназы и др.), принятых внутрь. Эти ферменты, как показали тесты с воздействием кининов на матку, тормозят активность брадикинина (и других кининов). Это лишний раз доказывает, что ферменты могут всасываться из пищеварительного тракта.
Экспериментальные воспалительные реакции, вызываемые различными методами (тесты с отеком лапы крысы, инъекции кротонового масла, создание гранулематозного кармана, формалинового отека и т. п.), в неодинаковой степени чувствительны к биологическим и химическим ингибиторам воспаления. В эксперименте с гранулематозным карманом наиболее благоприятный эффект дает парэнтеральное введение протеаз, о чем сообщают единодушно многие исследователи (например, Унгар, Шерри, Коэн, Нейлор-Фут). Иннерфилду удалось получить положительный эффект от перорального введения протеаз при гепатите, вызванном внутри-кожной инъекцией четыреххлористого углерода.
Для того чтобы доказать, что противовоспалительное действие обусловлено только протеолитической активностью, трипсин и химотрипсин обрабатывали ε-аминокапроновой кислотой; инактивированный таким способом фермент не оказывал на экспериментальное воспаление никакого влияния [54].