Эндо среда

Эндо среда (S. Endo) — это дифференциально-диагностическая среда для выделения и идентификации кишечных бактерий при бактериологических исследованиях пищевых продуктов, сточных вод и пр.

Состав среды Эндо: пептона — 1%, лактозы — 1 %, двузамещенного фосфорнокислого калия (К2НРO4) — 0,35%, агар-агара — 1,5%. Все ингредиенты, за исключением лактозы, растворяют в воде при кипячении или в автоклаве. Во избежание карамелизации сахара лактозу добавляют после растворения всех остальных компонентов среды. Кроме лактозы, среда не должна содержать никаких других углеводов, поэтому при ее изготовлении не рекомендуется использование мясной воды; можно применять любой пептон или гидролизат белков. Индикатор готовят ex tempore и добавляют к расплавленной питательной основе. Среда может быть использована сразу после приготовления без предварительной стерилизации; при необходимости ее стерилизуют в течение 30 мин. при t° 110°; рН готовой среды 7,4—7,6.

Индикатором служит соединение основного фуксина с сернистокислым натрием. Приготовление индикатора: 0,25 г безводного сернистокислого натрия или 0,5 г кристаллического (из расчета на 100 мл среды) растворяют в 5 мл дистиллированной воды и добавляют спиртовой (1—2%) раствор основного фуксина до тех пор, пока раствор из красного не превратится в бледно-розовый.



Приготовленный индикатор добавляют к расплавленной питательной основе и после тщательного перемешивания среду разливают в стерильные чашки Петри, которые подсушивают в термостате при 37° в течение 30 мин. в открытом состоянии. Готовая к употреблению среда Эндо имеет бледно-розовый цвет либо бесцветна; она должна быть использована в течение суток, так как при длительном хранении происходит покраснение среды и она становится непригодной.

Колонии бактерий, сбраживающих лактозу, на среде Эндо приобретают интенсивно красный цвет с зеленым металлическим блеском. Бактерии, не сбраживающие лактозу, формируют бесцветные либо цвета окружающей среды колонии.

В среде Эндо основной фуксин, в химическом отношении являющийся производным солянокислого розанилина, при соединении с сернистокислым натрием вследствие редуцирования обесцвечивается. При росте бактерий, разлагающих лактозу, промежуточный продукт (ацетальдегид), возникающий в результате окисления сахара, реагирует с сернистокислым натрием и фуксин вновь приобретает красный цвет.

Широкое распространение получил сухой агар Эндо, приготовляемый по специальной прописи и выпускаемый в виде порошка. При изготовлении среды Эндо берут 5 г порошка на 100 мл дистиллированной воды, нагревают до его растворения и, прокипятив 5 мин., разливают в стерильные чашки Петри.

Тифо-паратифозные и дизентерийные бактерии на среде Эндо образуют бесцветные колонии, кишечная палочка и другие разлагающие лактозу микроорганизмы — красные. Необходимо помнить, что фуксин обладает бактериостатическим действием, которое более выражено при температуре 37°. Поэтому учет результатов следует производить дважды: через 24 часа после инкубации в термостате и 24—48 часов выдерживания посевов при комнатной температуре. См. также Дифференциально-диагностические среды.