После просмотра хроматограммы в ультрафиолетовом свете пятно альдостерона-диацетата вырезают, измельчают и элюируют три раза 4 мл метанола (2; 1; 1 мл) встряхиванием, каждый раз в течение 1 часа, на шуттль-аппарате. На спектрофотометре СФ-4 определяют оптическую плотность элюата против элюата пустой зоны. Количество альдостерона в элюате рассчитывают по концентрационной кривой альдостерона, а при отсутствии последнего по концентрационной кривой гидрокортизона или кортизона (построенной от 5 до 50γ). Если пятна не обнаруживают при просмотре хроматограммы в ультрафиолетовом свете, то вырезают и элюируют участок бумаги на уровне свидетеля альдостерона-диацетата. Затем метанол упаривают досуха и в сухом остатке альдостерон определяют по реакции с синим тетразолием по методу Новацинского.
А) Для количества более 2 у. К сухому остатку в пробирке приливают 1,5 мл 95%-ного этанола, 0,25 мл 1%-ного раствора гидроокиси тетраметиламмония (раствор готовят добавлением 9 мл 95%-ного эталона к 1 мл 10%-ного водного раствора гидроокиси тетраметиламмония) и 0,25 мл 500 мг%-ного раствора синего тетра-золия в 95%-ном этаноле. Раствор перемешивают и после 25-минутного стояния в темноте при 25° реакцию прекращают добавлением 1 мл ледяной уксусной кислоты. Одновременно проводят реакцию с элюатом пустой зоны с бумаги. Интенсивность окраски полученного синего формазана измеряют на спектрофотометре при 510 миллимикронах против пустой зоны.
Б) Для количества меньше 2 у. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл 95%-ного этанола, добавляют 0,1 мл 1%-ного раствора гидроокиси тетраметиламмония и 0,1 мл раствора 500 мг%-ного синего тетразолия в 95%-ном спирте. Смесь после хорошего перемешиваний, 25-минутного стояния в темноте при 25° и добавления 0,1 мл ледяной уксусной кислоты измеряют на спектрофотометре при 510 миллимикронах против пустой зоны. Измерения проводят в микрокюветах, применяя диафрагму с точечной щелью.
Количество альдостерона после проведения реакции с синим тетразолием рассчитывают по концентрационной кривой синего формазана, полученного со стандартными растворами гидрокортизона или кортизона (от 0,5 до 10 микрограммов). При отсутствии тетра-метиламмония гидроксида можно использовать холин.
Конечные результаты выражают в микрограммах альдостерона в суточном количестве мочи, У здоровых людей за сутки выделяется с мочой 1,5—5,0 у альдостерона.