Нормальная функция яичек зависит от гонадотропной активности передней доли гипофиза. Экскреция же аденогипофиза находится в зависимости от функции гипоталамо-гипофизарной системы. Кроме того, нарушение функции щитовидной железы может неблагоприятно отражаться на процессе спермиогенеза.
Кора головного мозга оказывает влияние на функцию яичек (спермиогенез) через гипоталамус, минуя гипофиз. Для дифференциального диагноза гипер-, гипо- и нормогонадотропного гипогонадизма большое значение имеет определение гонадотропинов в моче. Пользуясь методом Цондека и в особенности его модификацией (Klinefelter et al., 1943), можно определить количество гонадотропинов. При подкожных инъекциях водного раствора очищенного экстракта мочи, содержащей гонадотропный гормон, увеличивается вес матки и ее придатков, что часто удается констатировать макроскопически. Эта биологическая реакция указывает на наличие в экстракте мочи преимущественно ФСГ, хотя часто в нем обнаруживают и небольшие количества ИКСГ (И. М. Порудоминский, 1964).
По данным различных авторов, у половозрелого мужчины за сутки с мочой выделяется в среднем от 20 до 40 ME гонадотропина. Количество ниже 10 и выше 52 ME считается патологическим.
Для дифференциальной диагностики первичного и вторичного гипогонадотропного гипогонадизма могут быть использованы тесты Heller, Nelson (1948). Эти пробы дают возможность установить, существует ли в лейдиговских клетках способность к выработке тестостерона.
При суждении о функциональной недостаточности половых желез определенное диагностическое значение имеет установление общего количества содержащихся в моче стероидов с кетоновой группой (17-кетостероиды), куда входят дериваты андрогенных гормонов, выделяемых как надпочечниками, так и половыми железами. Считается, что в норме 2/3 выделяемых 17-кетостероидов вырабатываются у мужчин в коре надпочечников и 1/3 — в яичниках. Выделение этого вида гормонов составляет за сутки у половозрелых мужчин 10—21 мг (И. М. Порудоминский, 1968). Определение 17-кетостероидов имеет большое практическое значение для диагностики вторичной недостаточности яичек при гиперфункции коры надпочечников. В подобных случаях гонадотропный гормон в моче обнаружить не удается. Для определения 17-кетостероидов применяется реакция Циммермана (1935) в различных модификациях.
Для уточнения вопроса об участии надпочечниковых фракций андрогенов в изменении обмена стероидных гормонов, помимо определения 17-кетостероидов, требуется вычисление бетафракций (эпиандростерон и дегидроэпиандростерон). Гормоны этой фракции являются конечными продуктами метаболизма исключительно надпочечниковых гормонов (И. М, Порудоминский, 1960).
У здоровых мужчин в среднем выделяется с мочой 1,9 мг дегидроэпиандростерона в сутки, что составляет 7—12% от общей суммы 17-кетостероидов. Определение дегидроэпиандростерона может быть произведено по методу, разработанному Е. М. Рахмалевич и В. Г. Орловой (1961).
Богатые липоидами клетки Лейдига, обладая эндокринной функцией, вырабатывают тестостерон. Этот гормон обусловливает либидо, эрекцию, развитие половых желез, эякуляцию. Тестостерон действует на функцию простаты и семенных пузырьков.
McCullagh (1932) нашел, что введение водных экстрактов из яичек ведет к исчезновению кастрирующего влияния в гипофизе. Этот воднорастворимый экстракт был назван инхибином.
Tornblum (1942) экстрагировал из яичек быка фракции, которые имели биологические свойства, близкие к свойствам эстрадиола. Howard и соавторы (1950) установили, что описанное выше вещество продуцируется сертолиевыми клетками и назвали его Х-гормоном. По их заключению, это аналог эстрогенов у женщин. Авторы отмечают, что подобно тому как гранулезные клетки фолликула у женщины под влиянием фолликулостиму-лирующего гормона секретируют эстрогены, так и клетки семенных канальцев (клетки Сертоли) яичек мужчины под влиянием ФСГ секретируют Х-гормон. Авторы доказали выделение второго тестикулярного гормона, когда при гистологическом исследовании яичек у мужчин с синдромом Клейнфельтера была обнаружена гиалинизация канальцев без деструкции клеток Лейдига. При подобном состоянии отмечено увеличение экскреции ФСГ.
Все это дало возможность сделать вывод, что клетки Сертоли вырабатывают гормон, задерживающий выделение ФСГ, в то время как клетки Лейдига секретируют андрогены.
Nelson и Heller (1945) утверждают, что в подобных случаях они находили клетки Лейдига гистологически измененными, и это, по их мнению, могло влиять на выработку ФСГ. В то же время Howard и соавторы (1950) обнаружили клетки Лейдига в нормальном состоянии, когда налицо были деструкция канальцев и большое выделение ФСГ гипофизом. В своих наблюдениях авторы обычно находили нормальную экскрецию 17-кетостероидов.
В дальнейшем Bartter и соавторы (1950) установили, что Х-гормон, являясь эссенциальным фактором в спермиогенезе, тормозит секрецию гипофизом ФСГ, стимулирует продукцию лютеонизирующего (ИК.СГ) гормона и задерживает развитие гинекомастии. Авторы уверены, что Х-гормон продуцируется клетками Сертоли: у пациентов с поражениями канальцев без изменения клеток Сертоли они наблюдали нормальную или только умеренно сниженную экскрецию ФСГ, тогда как при поражении клеток Сертоли выделение фолликулостимулирующего гормона значительно повышалось.
Интересны данные Huggins и Moulder (1945), которые доказали, что клетки Сертоли, как и другие стероидопродуцирующие клетки (клетки Лейдига), содержат липоиды.
Известно, что в организме мужчины наравне с андро-генами вырабатывается некоторое количество эстрогенов. В моче жеребца обнаружено значительное содержание эстрадиола и эстропа. Эстрогены найдены также в testis быка, поросенка и оленя (Burrows, Horning, 1952).
Huggins и Moulder (1945) описали опухоль из сертолиевых клеток у 5 собак. У них были обнаружены увеличение молочных желез и другие симптомы феминизации.
Howard и соавторы (1950) предположили, что Х-гормон в яичках мужчин служит аналогом эстрогена в яичниках женщины. Авторы не утверждают, что этот гормон является эстрогеном, однако считают, что он вырабатывается клетками Сертоли. Авторы указали, что это может быть ∆5-прегненолон, который был изолирован из яичек свиней. Этот стероид оказывает выраженное стимулирующее действие на спермиогенез, а не на функцию простаты и клеток Лейдига у гипофизэктомированных животных.
Весьма интересно сообщение Dirscherl и Zilliken (1949) о том, что в экстракте из гидролизированной человеческой спермы ими обнаружен дегидроандростерон. Эти данные были подтверждены в 1950 г. Dirscherl и Knuchel, которые предложили специфическую цветную реакцию на дегидроандростерон. Эти авторы обнаружили, что сперма нормального мужчины содержит в среднем 5,5 мг% дегидроандростерона. Кроме того, данный гормон находится лишь в спермиях и отсутствует в жидкой части эякулята.
Molnar и Szendroi (1950) отмечали наличие андрогенов в сперме. По их данным, количественное содержание 17-кетостероидов не зависит от концентрации семенных нитей. В дальнейшем было установлено, что цветная реакция, предложенная Dirscherl и Knuchel (1950), не является столь специфичной для дегидроандростерона, и поэтому обнаруженное ими в сперме вещество могло быть и другим гормоном.
В 1963 г. вышло несколько работ, посвященных андрогенной активности спермы человека. Одна из них принадлежит Dirscherl и Brener (1963). Авторы обнаружили в человеческой сперме гормон, который был идентифицирован как дегидроандростерон. По их данным, его содержание равно 6,9 мкг на 100 мл.
Однако Raboch с соавторами (1963), а также Rezabek и Raboch (1963) не смогли обнаружить в своих наблюдениях андрогенной активности спермы человека. По данным этих авторов, в эякуляте вообще отсутствуют такие гормоны, как тестостерон, андростерон, дегидро-эпиандростерон.
Molnar (1969), определяя количество 17-кетостероидов во всем эякуляте (20 исследований) и отдельно в плазме (10 наблюдений). По его данным, в 1 мл эякулята содержится 32—65 мг 17-кетостероидов.
Нами было проведено определение 17-кетостероидов в эякулятах 18 мужчин. Мы получили высокие результаты (1 у) гормона на 1 000 000 спермиев. Определение дегидроизоандростерона можно проводить по методике Мэнсона (1948), основанной на использовании цветной реакции Петтенкофера.
Дистиллированный фурфурол (бесцветный продукт) растворяют в 50% уксусной кислоте в равных частях и сохраняют при температуре 15° (хранение с использованием для реакции возможно до месяца). Готовят стандартный основной раствор дегидроандростерона, содержащий 11,45 мг его ацетата (10 мг гормона в 100 мл ледяной уксусной кислоты). При дальнейшем разведении получают стандартные растворы с содержанием дегидроизоандростерона соответственно 0,5; 1 и 3,5 мг в 100 мл раствора. Кроме того, необходимо иметь 16 н. раствор серной кислоты, 50% раствор уксусной кислоты (по весу), 10% раствор соляной кислоты. К 2 мл плазмы спермы прибавляют 10 мл 10% соляной кислоты в пробирке с трубочкой, кипятят 12 минут, затем охлаждают в проточной воде и экстрагируют эфиром в делительной воронке (3 раза по 5 минут). Экстракт промывают трижды 10% раствором едкого натра, дважды водой и затем испаряют до сухого остатка, который растворяют в 0,5 мл ледяной уксусной кислоты. Таким же образом обрабатываются стандартные и контрольные растворы. В каждую колбу добавляют по 7,5 мл 16 н. серной кислоты, размешивают, ставят на водяную баню на 12 минут при 67°, а затем охлаждают ледяной водой в течение 1 минуты. По данным фотометрирования делают калибровочную кривую, по которой определяют содержание дегидроизоандростерона в опыте.
Для исследования мы брали параллельно семенную плазму и цельный эякулят, а также эякулят с разрушенными головками спермиев. В 22 наблюдениях мы получили содержание дегидроизоандростерона в эякуляте от 3,4 до 7,2 мг на 100 мл. Доказать зависимость содержания гормона от качества эякулята (концентрации спермиев) путем статистической обработки цифровых данных не удалось.
В настоящее время еще нет общепризнанных методик для определения гормонов в сперме. Если считать, что гормоны содержатся в основном в головках семенных нитей, то последние перед исследованием надо разрушать.
При более тщательном разрушении спермиев мы обнаруживали и более высокое содержание гормона. В то же время мы не можем с достаточной достоверностью утверждать, что на интенсивность цветной реакции в наших исследованиях не влияли различные хромогены, которые могут присутствовать в эякуляте. Вопрос об андрогенной функции спермы остается нерешенным. Разработка же этой проблемы открывает широкие перспективы.