В тесте используются сыворотка больного, неинфекционные аллергены в тех же концентрациях, как в предыдущих тестах, и взвесь тучных клеток перитонеальной жидкости крыс.
Реактивы и оборудование те же, что и при прямом базофильном тесте.
Перитонеальные тучные клетки крысы получают следующим образом: под глубоким эфирным наркозом крысе внутрибрюшинно вводят 20 мл подогретого до 37° С 0,9% раствора хлористого натрия, производят легкий массаж передней стенки живота в течение 1,5 минуты, а затем по его средней линии делают ножницами послойный разрез длиной 1 — 1,5 см. Осторожно переворачивают крысу брюшком вниз и по свисающей из отверстия петле кишечника перитонеальная жидкость стекает в пробирку, смоченную гепарином. Собранную жидкость центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5—8 минут. Прозрачная надосадочная жидкость сливается, оставшаяся на дне пробирки взвесь тучных клеток используется в эксперименте.
Техника. На предварительно обезжиренное и окрашенное 0,3% раствором «нейтрального красного» предметное стекло наносится по 0,05 мл три компонента — исследуемая сыворотка, взвесь перитонеальных тучных клеток крысы и испытуемый аллерген, перемешивают и покрывают покровным стеклом, края которого смазаны вазелином. Параллельно готовятся контрольные препараты: 1-й —0,05 мл взвеси тучных клеток + 0,05 аллергена; 2-й — 0,05 мл взвеси тучных клеток + 0,05 мл сыворотки больного. Препараты— опытный и контрольные — ставят на 15 минут в термостат при 37°С, затем под иммерсионной системой микроскопа подсчитывают по 40 тучных клеток в каждом препарате и отмечают среди них количество дегранулированных клеток. Деструкция тучных клеток проявляется «разбуханием» клеток, появлением по периферии вакуолей, «опустошением» клеток от гранул, выходом последних за пределы клетки. Оценка реакции проводится по тем же признакам, что и предыдущие.