Реакция лейкоцитолиза может проводиться с неинфекционными и бактериальными аллергенами. Бактериальные аллергены применяются в концентрации 1 кожная доза (КД) в 0,1 мл раствора. Бытовые, эпидермальные, пыльцевые, пищевые и лекарственные аллергены применяются в тех же концентрациях, как в прямом базофильном тесте.
Оборудование и реактивы: термостат, микроскоп, меланжеры лейкоцитарные, камера Горяева, стерильные пробирки, пипетки, гепарин, жидкость Тюрка, 0,9% раствор хлористого натрия.
Техника. В стерильную пробирку, смоченную гепарином (0,1 мл), набирают из вены 5 мл крови и тщательно перемешивают. Затем разливают по 0,45 мл гепаринизированной крови в стерильные пробирки, одна из которых является контрольной. Добавляют в контрольную пробирку 0,05 мл 0,9% раствора хлористого натрия, а в опытные—по 0,025 мл 0,9% хлористого натрия и по 0,025 мл аллергена (отдельного для каждой пробирки). Пробирки инкубируют в термостате при 37° С 80 минут, после этого они тщательно перемешиваются и под малым увеличением микроскопа подсчитывается количество лейкоцитов в камере Горяева (в 25 больших квадратах) в контрольной и в каждой опытной пробирке.
Оценка результатов. РЛЛ считается положительной, если произошло снижение количества лейкоцитов в опытной пробирке по сравнению с контрольной более чем на 10%. Результат определяется по формуле:
где Лк — количество лейкоцитов в контрольной, а Ло — количество лейкоцитов в опытной пробирке. По степени интенсивности реакция оценивается как слабоположительная (+) при лизисе 11—20%.
умеренно положительная ( + +) — при лизисе 21—40%, резко положительная (+ + +)—при лизисе более 40% клеток по сравнению с контролем.