В настоящее время доказано, что определение количества фруктозы в эякуляте имеет большое практическое значение. Это объясняется следующим: 1) первоначальное количество фруктозы позволяет судить о функции лейдиговских клеток; 2) повторное определение этого показателя через установленные промежутки времени характеризует обмен веществ спермиев и их жизнеспособность.
Образование фруктозы происходит в семенных пузырьках и находится в тесной зависимости от продуцируемого в лейдиговских клетках тестостерона. Недостаточное количество фруктозы в эякуляте при нормальном состоянии семенных пузырьков говорит о нарушении функции лейдиговских клеток. Понижение количества фруктозы при нормальной спермиограмме указывает на изолированное нарушение функции межуточных клеток яичка в результате недостаточного образования гонадотропного гормона в передней доле гипофиза.
По данным Р. Б. Капанадзе (1962), фруктоза является одним из главных факторов, характеризующих жизнеспособность спермиев, поэтому количественное определение ее при суждении об оплодотворяющей способности эякулята является обязательным. Однако при наличии достаточного количества фруктозы семенные нити иногда не в состоянии ее использовать. В этом убеждает присутствие в эякуляте дегенеративных форм спермиев. Способность к фруктолизу иногда исчезает и у физиологически полноценных семенных нитей в связи с продолжительностью их существования. Для определения жизнеспособности спермиев пригодным тестом оказалось определение величины фруктолиза. Вполне достаточно определение фруктолиза за 2-й час после эякуляции. Определение первоначального количества фруктозы и индекса фруктолиза производится одним и тем же способом.
Фруктоза является единственным физиологическим субстратом для образования в сперме молочной кислоты; на этом основании предложен количественный колориметрический метод с резорцином для определения скорости расщепления фруктозы в эякуляте. Метод определения разработан Roe (1934), в основу его положена цветная реакция, открытая Seliwanoff (1887).
Количество фруктозы мы определяли через 1 час после эякуляции по методике, описанной Bistop и соавторами (1954). В пробирке смешивали 0,5 мл эякулята и 0,9 мл дистиллированной воды, добавляли 2 мл 2% раствора кристаллического сульфата цинка и 2 мл 0,1 н. раствора едкого натра, нагревали в кипящей водяной бане в течение 5 минут и фильтровали. К 2 мл прозрачного фильтрата добавляли 2 мл 0,1% спиртового раствора резорцина и 6 мл 30% раствора соляной кислоты. Смесь нагревали в водяной бане при 80—85° в течение 10 минут, затем быстро охлаждали под проточной холодной водой. Взятое количество фильтрата (2 мл) соответствует 0,04 мл эякулята.
Интенсивность полученной при этом бордовой окраски измеряли на фотоэлектроколориметре ФЭК-М. Из показаний прибора находили содержание фруктозы по кривой, вычерченной на основании измерений растворов фруктозы различной концентрации, обрабатывая их, как и эякулят, по описанной выше методике. Для получения этой кривой химически чистую фруктозу высушивали в течение 3 недель в эксикаторе над хлористым кальцием. По нашим данным (92 исследования), количество фруктозы в эякуляте было в среднем 275 мг% с колебаниями от 25 до 682 мг%. В то же время среднее количество фруктозы зависело от качества эякулята. Так, в случае нормо-, астено- и тератоспермии содержание фруктозы было большим, нежели при олиго-, азоо- и аспермии. Это различие статистически достоверно. Все это говорит о том, что при терато- и астеноспермии в какой-то степени нарушен спермиогенез, а при олиго-, азоо- и аспермии к этому нарушению присоединяются более глубокие гормональные сдвиги. Содержание в эякуляте 250 мг% фруктозы мы считаем достаточным, от 150 до 250 мг%—пониженным и менее 150 мг%—низким (М. А. Кунин, 1968).
Фруктоза потребляется спермиями как энергетический материал, но это не значит, что при большом ее количестве в эякуляте должно быть и большое количество активно подвижных спермиев. Например, при тератоспермии в ряде случаев через 1 час после эякуляции отмечен высокий процент хорошо подвижных семенных нитей, но уже через несколько часов при достаточном содержании фруктозы активно подвижных спермиев обнаружить не удавалось. Видимо, потреблять имеющуюся фруктозу могут лишь неизмененные семенные нити. Через 1 час после первого исследования повторно уточнялось количество фруктозы в эякуляте. Разница между данными вторичного и первичного определения давала фруктолиз на 2-й час после эякуляции. При нормоспермии величина фруктолиза была не меньше 186 у, а в ряде случаев — значительно больше (до 372 у). Результаты наших исследований подтвердили зависимость фруктолиза от концентрации активно подвижных спермиев в эякуляте и важность данного определения для суждения об оплодотворяющей способности эякулята.