Антибиотики группы тетрациклина

Эмбриотоксический эффект тетрациклина удавалось наблюдать только при использовании в эксперименте очень высоких доз препарата [Детюк Е. С. и др., 1971; Szumigowska-Szrajber G., Yeske I., 1973]. Если же беременным животным вводили тетрациклин либо в более низких дозировках, либо в течение ограниченного промежутка времени, то действие препарата в основном выражалось в некотором снижении массы тела плода [Баркалая А. И., Прохорова А. М., 1963; Kurley L. S., Tuschmann-Duplessis Н., 1963].

По мнению L. Е. Totterman, L. Saxen (1969), отставание в развитии плодов при введении беременным самкам тетрациклина носит специфический характер, обусловленный избирательным накоплением препарата в скелете с последующим торможением роста и развития костей. Наиболее убедительные данные о тератогенном действии тетрациклина удалось получить В. Filippi, V. Mela (1958) и В. Filippi (1967) в экспериментах на крысах и мышах. Авторы наблюдали возникновение разнообразных уродств у 50% плодов при введении тетрациклина самкам крыс в сроки беременности, соответствующие органогенезу и плацентации. Среди аномалий развития чаще всего наблюдались расщепление верхнего неба, гипоплазия нижней челюсти, укорочение конечностей и синдактилия. По своим внешним проявлениям эти уродства напоминали таковые при дефиците витамина В2, что послужило основанием для возникновения теории о роли гиповитаминоза группы В в происхождении дефектов развития плодов под влиянием тетрациклина. Тератогенное действие тетрациклина было подтверждено также в экспериментальных исследованиях Е. С. Детюк и соавт. (1971).

Нами [Кирющенков А. П., 1975] в экспериментальных исследованиях in vivo и in vitro были изучены эмбриолетальный, фетотоксический и тератогенный эффект тетрациклина. Кроме того, мы определяли влияние этого антибиотика на хромосомный аппарат фибробластов плодов человека. Такой комплексный подход позволил достаточно полно охарактеризовать перинатальную фармакологию тетрациклина. В опытах in vivo подопытным крысам тетрациклин вводили внутримышечно в дозе 100 мг/кг в течение 1—6 дней беременности, что соответствовало периоду предымплантационного развития эмбриона. Было установлено, что под влиянием антибиотика значительно возрастали показатели предымплантационной (9,0+1,6%) и постимплантационной (13,2+2,0%) гибели зародышей (р<0,001 по сравнению с контролем).

В исследованиях, проводимых на культивированных in vitro эмбрионах мышей, находящихся на стадии от 2 бластомеров до бластоцисты, что соответствует 2—5 дням предымплантационного развития, было показано, что пороговая доза тетрациклина, вызывающая торможение развития эмбрионов, составляла 0,01 мг/мл и была в 100 раз выше, чем у оксациллина и канамицина.

Для изучения фетотоксических и тератогенных свойств тетрациклина подопытным животным внутримышечно вводили препарат в дозах 25 и 100 мг/кг с 9-го по 15-й день беременности, что соответствовало периоду органогенеза и плацентации плода. В первой серии опытов (доза тетрациклина составила 25 мг/кг) введение подопытным животным антибиотика сопровождалось повышением постимплантационной (7,8±2,3%; Р<0,001 по сравнению с контролем) и общей эмбриональной смертности (10,0+2,8%; Р<0,05 по сравнению с контролем). Увеличение дозы тетрациклина в 4 раза (100 мг/кг) приводило к некоторому повышению этих показателей (соответственно до 11,4±2,5 и 13,0+3,0%). При использовании микроанатомического метода Wilson, основанного на изучении серийных срезов плодов 21-го дня развития, аномалий развития выявлено не было. В то же время у многих плодов, подвергавшихся воздействию тетрациклина в период органогенеза и плацентации, были обнаружены подкожные кровоизлияния, геморрагии в оболочке мозга, скопление крови в серозных полостях. При патогистологическом изучении плаценты (доза тетрациклина 25 мг/кг) обращало на себя внимание неравномерное кровенаполнение лабиринта и наличие кровоизлияний во всех отделах плаценты. Наряду с этим наблюдалась вакуолизация цитоплазмы клеток цитотрофобласта, снижение содержания ШИК-позитивного материала в светлых (гликогенсодержащих) клетках. Введение большей дозы антибиотика (100 мг/кг) приводило к возникновению обширных кровоизлияний в лабиринте плаценты и вакуолизации цитоплазмы клеток цитотрофобласта.

Явления вакуольной дистрофии захватывали также отдельные гигантские клетки. В клеточных элементах лабиринта также отмечались явления вакуолизации, пикноз ядер и выраженное снижение содержания РНК. Помимо плаценты, патоморфологическому изучению была подвергнута печень плодов, подвергавшихся воздействию тетрациклина в период органогенеза. Было установлено, что тетрациклин вызывал вакуолизацию цитоплазмы большинства гепатоцитов. Явлений жировой дистрофии в печеночных клетках обнаружено не было. Прямое эмбриотоксическое действие тетрациклина изучалось в экспериментах in vitro на эмбрионах крыс, культивируемых по методу New с пресомитной стадии до стадии 24 сомитов, что соответствовало самому раннему периоду органогенеза. В результате этого исследования удалось определить пороговую концентрацию тетрациклина, вызывающую выраженный эмбриотоксический эффект и равную 0,01 мг/мл. При данной концентрации антибиотика в среде культивирования отмечалось резкое уменьшение числа сформированных сомитов (в среднем на 6—8 пар), отставание дифференцировки мозговых пузырей, недоразвитие аллантоиса и замедление сердечных сокращений. Необходимо также отметить, что пороговая концентрация тетрациклина (0,01 мг/мл) была значительно меньше, чем у оксациллина (5 мг/мл) и канамицина (5 мг/мл). Эти наблюдения позволяют считать, что тетрациклин обладает значительно более выраженными эмбриотоксическими свойствами по сравнению с двумя другими исследованными нами антибиотиками. Значительный интерес представляют результаты изучения влияния тетрациклина на культуру клеток эмбриональных фибробластов человека. Этот метод исследования считается важным дополнительным тестом, позволяющим судить о таких сторонах прямого действия лекарственных препаратов на эмбриональные клетки, как подавление митотической активности, изменение морфологии клеток, возникновение хромосомных аберраций и др. Мы изучали влияние тетрациклина в концентрации 2 мкг/мл на культуру ткани фибробластов эмбрионов человека. Такая концентрация антибиотика создается в крови человека при внутримышечном введении 100 мг препарата. Было установлено, что добавление тетрациклина в среду культивирования сопровождалось увеличением частоты хромосомных аберраций почти на всех стадиях митотического цикла (Р<0,001). Соответствующие данные приведены в таблице 15.

Таблица 15. Влияние тетрациклина в концентрации 2 мкг/мл на хромосомный аппарат культуры клеток эмбриональных фибробластов человека