Бензидиновая проба — это обнаружение крови в моче, кале, содержимом желудка при помощи бензидинового реактива (раствор бензидина в уксусной кислоте + перекись водорода). Мочу и желудочный сок нужно отфильтровать через бумажный фильтр, а потом нанести на него реактив. В случае присутствия крови появляется синее или зеленое окрашивание (рис. 1). Кал наносят тонким слоем на предметное стекло и добавляют к нему несколько капель бензидинового реактива. При наличии в кале крови появляется соответствующее окрашивание (рис. 2 и 3).
Бензидиновая проба — реакция, применяемая для обнаружения крови в кале, моче, желудочном соке, рвотных массах и основанная на окислении бензидина (парадиаминодифенила) перекисью водорода в результате пероксидазного действия кровяного пигмента. Чаще пользуются модификацией бензидиновой пробы, предложенной Грегерсеном (М. Gregersen): смешивают 0,025 г основного бензидина и 0,1 г перекиси бария, добавляют (непосредственно перед исследованием) 5 мл 50% раствора уксусной кислоты и взбалтывают до полного растворения бензидина. Перекись бария можно заменить перекисью водорода; в этом случае приготовляют насыщенный раствор бензидина в уксусной кислоте и смешивают его с равным количеством 3% раствора перекиси водорода.
Подлежащий исследованию кал размазывают тонким слоем на предметном стекле и наносят на него несколько капель реактива. Жидкие материалы (моча, содержимое желудка и пр.) помещают в объеме 1 мл в пробирку и прибавляют 5—6 капель реактива; иногда пробу производят на фильтровальной бумаге, через которую профильтровано 50—100 мл исследуемой жидкости. В присутствии крови получается яркое синее или зеленое окрашивание. Чувствительность бензидиновой пробы 1:100 000. При исследовании каловых масс положительные результаты могут быть получены за счет кровяных пигментов, содержащихся в пище. Поэтому перед проведением бензидиновой пробы необходимо на три дня исключить мясо и мясные навары из пищевого рациона исследуемого. Бензидиновые пробы обычно производят при подозрении на скрытое кровотечение.